基因克隆中有关点突变引物设计问题我需要用引物设计点突变一段基因的3‘端几组氨基酸密码子(每次突变一个氨基酸密码子),突变的密码子已确定,不能用密码子的兼并性,想请问一下各位

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/03 17:21:17
基因克隆中有关点突变引物设计问题我需要用引物设计点突变一段基因的3‘端几组氨基酸密码子(每次突变一个氨基酸密码子),突变的密码子已确定,不能用密码子的兼并性,想请问一下各位

基因克隆中有关点突变引物设计问题我需要用引物设计点突变一段基因的3‘端几组氨基酸密码子(每次突变一个氨基酸密码子),突变的密码子已确定,不能用密码子的兼并性,想请问一下各位
基因克隆中有关点突变引物设计问题
我需要用引物设计点突变一段基因的3‘端几组氨基酸密码子(每次突变一个氨基酸密码子),突变的密码子已确定,不能用密码子的兼并性,想请问一下各位高手引物设计中要注意哪些问题
若是在下游引物末端几个碱基发生突变(假设以酶切位点为前端)需要在末端留多少个与模板吻合的碱基呢?那样引物不是会很长……

基因克隆中有关点突变引物设计问题我需要用引物设计点突变一段基因的3‘端几组氨基酸密码子(每次突变一个氨基酸密码子),突变的密码子已确定,不能用密码子的兼并性,想请问一下各位
退火温度,碱基数目20个左右,不要有形成发夹结构的碱基序列,GC含量要大于60%.

楼上说的不错。告诉你一个网站,http://frodo.wi.mit.edu/primer3/,在线设计引物,网站里面提到的变量就是你要注意的地方。你把模板序列,要求的碱基长度(一般16-20),退火温度,等信息都输进去,就会计算出最合适的引物,还有几对给你候选。我们实验室每年2-3篇Nature,Science,也是用这个来设计引物的,呵呵...

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楼上说的不错。告诉你一个网站,http://frodo.wi.mit.edu/primer3/,在线设计引物,网站里面提到的变量就是你要注意的地方。你把模板序列,要求的碱基长度(一般16-20),退火温度,等信息都输进去,就会计算出最合适的引物,还有几对给你候选。我们实验室每年2-3篇Nature,Science,也是用这个来设计引物的,呵呵

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基因克隆中有关点突变引物设计问题我需要用引物设计点突变一段基因的3‘端几组氨基酸密码子(每次突变一个氨基酸密码子),突变的密码子已确定,不能用密码子的兼并性,想请问一下各位 为什么在基因克隆中,除开设计PCR引物还要设计表达基因引物?如题.设计表达引物有什么要求吗? 自己设计了一对引物克隆一段基因,PCR出不来结果可能是什么问题? 有关基因克隆的问题请问我现在知道洋葱某个基因的中段序列,并且已经提取出了总RNA并进行了反转录.请问如何根据中断序列设计引物并克隆出全长基因?请尽量简单易懂些,我只是个高中生, 有关基因克隆的问题请问我现在知道洋葱某个基因的中段序列,并且已经提取出了总RNA并进行了反转录.请问如何根据中断序列设计引物并克隆出全长基因?请尽量简单易懂些,我没什么基础. 关于引物和目的基因的关系.针对某基因设计的同一对引物在不同人的基因组中扩增的片段一定一样吗在基因诊断时,比如镰状细胞贫血是点突变,患者和正常人在突变点两侧的基因是一样的,那 ncbi fasta 引物设计问题我查的禽流感np基因 我现要设计引物 但结果中有 cRNA mRNA genomic 三种我要选哪种作为引物设计的模板? 需要变成互补链吗?是不是变成fasta格式就直接可以设计了? 新手:如何给k-ras基因设计引物要进行癌症的检测,一般检测k-ras基因,求设计该引物的思路先从癌症患者血中提取DNA进行测序,对照正常基因,确定突变位点,再设计,为什么都是检测k-ras基因,但看 设计多克隆位点进行检查目的基因中是否有该位点需要什么软件 请问,我用OVERLAP PCR 合成一小片段我要突变的79bp的基因,需要高保真酶吗?还有就是,我不是将两个基因连起来,而是引物本身也是模板合成我的基因片段. 怎样查找基因序列RS号我要做基因多态性,知道SNP位点,设计引物需要序列RS号,请问怎样去查找 从突变体中克隆未知突变基因的方法? 质粒转录起始点插入两个碱基会移码突变么?从质粒中插入目的基因,设计引物的时候,目的基因的转录起始密码子ATG前插入了两个碱基,请问是否影响目的基因的正常表达?或者造成移码突变? 引物的设计 PCR扩增 连接 转化 这一系列是什么的步骤 基因克隆吗?那引物是干嘛用的 简并引物经PCR的产物是不是都需要经过克隆?我设计的是一对简并引物,测序后有4个位点出现重叠峰,是不是简并引物的PCR产物都会出现此现象?克隆后就能确定这4个重叠峰的碱基吗?我现在已经 一个未知基因用简并引物克隆出来后,再测序,那么测序分析后后,下一步做什么?基因在植物不同器官的表达,如何设计实验?我的下一步就是做这个 关于T-A克隆的一些问题我做完了T-A克隆,提取质粒以后,用我的目的基因引物做PCR,跑电泳跑出来了目的条带,但是有一些杂带,是怎么回事呢. 我需要设计引物,是不是得知道所有的基因序列了?